Les mycotoxines sont des métabolites fongiques toxiques présents naturellement dans les principaux constituants des céréales ainsi que dans les ingrédients mineurs des aliments pour animaux. Les différents composants de l'alimentation animale sont susceptibles de contenir une variété de mycotoxines différentes.

L'aflatoxine B1 est la seule mycotoxine réglementée avec une limite européenne de 5 ppb dans les aliments pour animaux laitiers, mais il existe des valeurs indicatives pour les niveaux de déoxynivalénol (DON), de zéaralénone (ZON), d'ochratoxine A (OTA), de fumonisines B1 et B2, de toxines T-2 et HT-2, soit onze mycotoxines au total si l'on inclut les quatre aflatoxines. 

La surveillance de ces mycotoxines dans les composants des aliments pour animaux et les produits finis est essentielle et une méthode bien établie utilisant une colonne d'immunoaffinité multi-mycotoxines suivie d'une analyse LC-MS/MS s'est imposée comme une méthode fiable et précise.

Origine des mycotoxines dans l'alimentation animale

La sensibilité des matrices aux infections fongiques est un facteur important pour déterminer quelles mycotoxines peuvent apparaître dans les composants de l'alimentation animale, tout comme l'origine géographique de l'alimentation.  En effet, les conditions climatiques jouent un rôle important dans l'infection fongique et la formation ultérieure de mycotoxines.

Ainsi, les conditions chaudes et humides favorisent l'apparition d'aflatoxines, tandis que les climats plus frais peuvent entraîner l'apparition de toxines du Fusarium telles que le DON et le ZON. Les différences de conditions climatiques à certains stades de la croissance des céréales peuvent également avoir un impact important sur l'infection fongique. Les conditions humides pendant la phase de floraison des céréales sont un facteur de risque qui peut signifier que certaines années sont nettement moins bonnes que d'autres en termes de présence de DON dans le blé.  

Certaines mycotoxines, comme les fumonisines, sont présentes uniquement dans le maïs et se forment avant la récolte, tandis que d'autres mycotoxines, comme l'OTA, se forment pendant le stockage du grain, mais peuvent être évitées si les conditions de stockage sont bien contrôlées. 

Certaines mycotoxines, comme le DON, sont omniprésentes dans le blé et peuvent être présentes à des niveaux très élevés, tandis que d'autres mycotoxines, comme le T-2 et le HT-2, sont présentes de manière plus sporadique et à des niveaux beaucoup plus faibles, mais leur toxicité est nettement plus élevée.

Problèmes d'exposition aux toxines réglementées

Des niveaux importants de mycotoxines dans les aliments pour animaux peuvent entraîner la mort du bétail, bien que cela soit beaucoup plus rare de nos jours. Il convient toutefois de rappeler que c'est la mort de 10 000 dindes causée par la farine d'arachide provenant du Brésil en 1960 qui a conduit à la découverte initiale des aflatoxines. La farine d'arachide reste un composant "risqué" à utiliser dans l'alimentation animale, car la prévalence de la présence d'aflatoxines dans les arachides est élevée.  

L'évaluation des risques liés à la présence de mycotoxines dans les aliments pour animaux permet de déterminer, d'une part, le niveau seuil à partir duquel des effets néfastes sur la santé peuvent affecter l'animal et, d'autre part, si la mycotoxine ou un de ses métabolites peut passer dans les produits animaux et présenter un risque pour la consommation humaine. 

Les niveaux auxquels des effets néfastes sur la santé peuvent se produire chez les animaux dépendent beaucoup de l'espèce. Par exemple, pour certaines mycotoxines telles que l'OTA et le ZON, les porcs présentent une sensibilité élevée, tandis que la volaille peut tolérer des niveaux beaucoup plus élevés sans présenter d'effets indésirables. Les chevaux sont extrêmement sensibles aux effets nocifs des fumonisines. Les réglementations contrôlant les mycotoxines dans les aliments pour animaux sont donc liées à l'utilisation prévue de l'aliment, des limites différentes étant appliquées pour les différentes espèces animales. 

Bien que plusieurs mycotoxines puissent être transférées à des produits animaux destinés à la consommation humaine, seule l'aflatoxine M1 dans le lait, qui est un métabolite de l'aflatoxine B1 dans l'alimentation des bovins laitiers, est une préoccupation majeure.  L'aflatoxine B1 est donc strictement contrôlée dans l'alimentation des bovins laitiers. L'OTA peut être transférée à la viande et aux abats, ce qui constitue une préoccupation plus spécifique dans certains pays où des réglementations sont en place.

Une autre préoccupation liée à la présence de mycotoxines dans les aliments pour animaux n'est pas directement abordée dans l'évaluation des risques, il s'agit de l'impact potentiel sur la productivité animale. De petits effets sur les rendements tels que la prise de poids ou la production d'œufs peuvent être évidents suite à l'exposition des volailles à de faibles niveaux de mycotoxines provenant des aliments pour animaux, avec des conséquences économiques importantes pour les agriculteurs, par exemple. 

Il existe donc une forte motivation pour minimiser la présence de mycotoxines dans les aliments pour animaux et les tests de routine jouent un rôle essentiel.

Limites réglementaires et valeurs guides pour les mycotoxines dans les aliments pour animaux

L'UE a fixé une limite réglementaire de 5 ppb pour l'aflatoxine B1 dans les aliments pour animaux laitiers, tandis qu'aux États-Unis, la limite est de 20 ppb pour les aflatoxines totales. Pour les matières premières des aliments pour animaux destinés à d'autres espèces animales, une limite de 20 ppb s'applique dans l'UE pour l'aflatoxine B1, tandis qu'aux États-Unis, elle est fixée à des limites de 100 à 300 ppb pour les aflatoxines totales dans les composants des aliments pour animaux à base de maïs, de graines de coton et d'arachides.  

Pour d'autres mycotoxines, l'UE dispose de valeurs indicatives destinées à contrôler la présence de DON, ZON, OTA, toxines T-2 et HT-2 et fumonisines dans les produits destinés à l'alimentation animale.  Les valeurs guides s'appliquent soit à des composants spécifiques des aliments pour animaux, soit à l'utilisation finale prévue des aliments complémentaires et complets pour animaux. 

Par exemple, une valeur indicative de 12 ppm pour le DON s'applique au maïs, tandis que pour les aliments complémentaires et complets pour porcs, la limite est de 0,9 ppm. Les valeurs guides les plus strictes pour le ZON et l'OTA reflètent leur plus grande toxicité par rapport au DON et aux fumonisines. 

Ainsi, il existe une valeur indicative de trois ppm pour le ZON dans les sous-produits du maïs, tandis que cette valeur est fixée à 0,1 ppm pour les aliments complémentaires et complets destinés aux porcelets et aux cochettes (jeunes truies), ce qui reflète la plus grande sensibilité des porcs au ZON, par exemple. 

Pour l'OTA, lorsque les porcs sont à la fois sensibles à l'OTA et qu'il existe un risque de transfert aux produits animaux, la valeur indicative est de 50 ppb pour les aliments complémentaires et complets. 

En ce qui concerne les toxines T-2 et HT-2, les chats font partie des espèces animales les plus sensibles et, dans l'UE, la valeur indicative pour la somme de ces deux toxines est de 50 ppb pour les aliments destinés aux chats. 

Le fait que ces valeurs guides pour les mycotoxines soient à plusieurs niveaux, avec des limites appliquées à la fois aux composants des aliments pour animaux et aux produits finis, signifie que les niveaux de contamination doivent être déterminés à la fois pour les matières premières afin de garantir la conformité, et pour faciliter le mélange des aliments composés. 

La multitude d'ingrédients utilisés dans les aliments pour animaux, d'origines géographiques diverses, nécessite de contrôler toutes les mycotoxines potentiellement préoccupantes et l'analyse des aliments pour animaux exige un contrôle multi-mycotoxines. 

Analyse multi-mycotoxines des aliments pour animaux

Il existe de nombreuses méthodes de détection des multi-mycotoxines par spectrométrie de masse qui préconisent une approche dite "diluer et tirer". Cette méthode consiste à extraire un échantillon d'aliment, à le filtrer et à l'analyser directement.  

Cependant, il est largement reconnu que cette approche est affectée par les co-extractifs de la matrice de l'aliment et diverses mesures sont essentielles pour corriger les "effets de matrice". Ces mesures comprennent souvent un étalonnage adapté à la matrice et l'utilisation de normes internes coûteuses marquées aux isotopes stables.

Cette approche simpliste de l'analyse des aliments pour animaux est essentiellement une méthode de dépistage et, pour une quantification précise, notamment l'analyse de composants complexes de l'alimentation animale - tels que les solubles de grains séchés de distillerie (DDGS) - il est essentiel de procéder à un nettoyage complet de l'extrait de l'aliment avant l'analyse par spectrométrie de masse. 

Le nettoyage le plus fiable et le plus efficace est réalisé à l'aide d'une colonne d'immunoaffinité (IAC) : un extrait de l'échantillon d'aliment passe directement à travers l'IAC et les toxines ciblées sont retenues de manière sélective.  

Après lavage de la colonne, les toxines peuvent être éluées puis déterminées par spectrométrie de masse.  Les colonnes d'immunoaffinité appropriées doivent être conçues pour l'analyse simultanée de toutes les mycotoxines réglementées par l'UE qui peuvent se trouver dans les aliments pour animaux et démontrer des taux de récupération élevés et une bonne précision. Cette démarche permettra ensuite de satisfaire aux exigences de performance des méthodes d'analyse fixées par les régulateurs de l'UE. 

L'analyse instrumentale des échantillons est adéquate

Il a été démontré précédemment que l'analyse instrumentale d'échantillons sans nettoyage est adéquate pour le dépistage, mais que pour les mesures définitives, le nettoyage de la CAI est essentiel.  Il a par exemple été démontré que pour la toxine HT-2 et le DON dans des échantillons d'aliments pour porcs, des interférences significatives étaient évidentes lorsque les extraits étaient analysés sans nettoyage. 

Ces interférences, qui avaient un impact sur la quantification, n'étaient plus présentes après le nettoyage de la CAI.  Alors que pour les enquêtes menées principalement à des fins académiques, une quantification "approximative" peut être acceptable, dans le secteur de l'alimentation animale, les incertitudes concernant les limites de conformité ne peuvent être tolérées. 

Les méthodes de référence utilisant le nettoyage de la CAI sont essentielles pour évaluer correctement les risques liés aux mycotoxines dans l'alimentation animale. C'est le cas que l'analyse soit effectuée par des laboratoires d'aliments pour animaux internes ou par des laboratoires de contact ou officiels externes.

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